Dnes vám předvedu, jak používat
UV-VIS Spektrofotometr Vernier.
Když spektrometr zakoupíte,
obdržíte jej v praktickém kufříku,
který obsahuje spektrofotometr,
napájecí zdroj,
USB kabel k připojení spektrometru
k počítači nebo LabQUestu,
a dvě kyvety z křemenného skla (kód: CUV-QUARTZ).
To jsou kyvety, které potřebujete k experimentům
podobným těm, které budu dnes ukazovat.
Před měřením se spektrofotometrem
se ujistěte, že je zapojeno napájení,
pak zkontrolujte, že se vypínač nachází v poloze ON,
a potom zapojte USB kabel k počítači
nebo LabQuestu.
Než začnete, zkontrolujte také,
že verze Logger Pro na vašem počítači
je 3.8.6.2 nebo vyšší.
Dnes budu předvádět použití s počítačem,
takže jsem do počítače připojila USB kabel
a jsem připravena začít.
Začněme tím, že UV-VIS spektrometr
má tři pracovní režimy.
Prvním je Absorbance a je zvolen jako výchozí.
Když spustím Logger Pro, měla bych vidět,
graf závislosti absorbance na vlnové délce.
Mohu také zvolit režim % Transmittance
nebo mód Intenzita pro měření vyzařování.
Chcete-li režimy přepnout,
zvolte z menu „Experiment“
položku „Nastavení měření“, „Spectrometer 1“.
Objeví se dialogové okno spektrometru.
Zde klepnete na duhovou ikonu
a vyberete si z nabídky režimů:
% Transmittance, Intenzita a Absorbance.
Při dnešní ukázce budu používat
režim Absorbance, takže jej ponechám.
První věcí, kterou v režimu Absorbance
nebo v režimu % Transmittance, chcete udělat je kalibrace spektrometru.
I tuto operaci můžeme zvolit z menu, ve kterém se právě nacházíme.
Když tedy klepnu na „Kalibrovat“, objeví se
samostatné dialogové okno pro kalibraci.
Před kalibrací je vyžadováno alespoň
90 sekund čekání.
Doporučujeme ale počkat zhruba 10 minut.
Je dobrým zvykem kalibrovat
těsně před tím, než začnete měřit.
Dáte tím lampě možnost zahřívat se co nejdéle
a maximálně se stabilizovat.
Jakmile se aktivuje tlačítko „Dokončit kalibraci“,
vložím do spektrometru
neutrální vzorek.
Dnes budu měřit absorbanci
vzorků Aspirinu, takže neutrální je voda.
Klepnu na tlačítko „Dokončit kalibraci“.
Několik sekund to bude trvat.
A pak stisknu tlačítko OK.
Dialogové okno teď už můžu zavřít
a jsem připravena měřit.
V režimu Absorbance se nabízí
tři různé typy měření.
Prvním je závislost absorbance na vlnové délce,
který generuje spektrum.
Druhým je závislost absorbance na koncentraci,
který lze využít k ukazání Beerova zákona.
A třetím typem je závislost absorbance na čase
vhodná k experimentům z reakční kinetiky.
Abych získala spektrum,
vložím nejprve do spektrometru absorbující vzorek,
a pak stisknu zelené tlačítko „Sběr dat“.
Rovnou bych měla vidět spektrum.
Jakmile jsem se spektrem spokojena,
klepnu na červené tlačítko „STOP“.
A teď budu chtít přiblížit tenhle pík,
takže klepnu na osu x
a vepíšu požadovaný rozsah.
Teď budu chtít ukazovat Beerův zákon
při vlnové délce této špičkové absorbance Aspirinu.
Abych to mohla udělat, klepnu na duhovou ikonu,
která se nachází zhruba v prostředku lišty nástrojů.
Je to ikona pro konfiguraci spektrometru.
Objeví se toto dialogové okno
a v něm vidíme tři různé typy měření.
Potřebuji ten třetí,
závislost absorbance na koncentraci,
kde už jsou názvy sloupců a jednotky již předvyplněny.
Pokud chcete, můžete tyto texty změnit.
Vlnová délka, která je jako první zvolena,
je automaticky ta nejvíce absorbující.
Pro tento experiment to ale nechceme,
chceme použít pík zde,
takže mohu ten pík vybrat buď klepnutím do grafu,
nebo ručně zvolit ze seznamu vlnových délek.
Pak klepnu na OK.
Program se mne zeptá, jestli chci uložit měřená data,
a v tomto případě chci, abych později viděla spektrum
nad daty z měření Beerova zákona.
Teď mám vše připraveno pro měření Beerova zákona.
Klepnu na tlačítko „Sběr dat“
nezaznamenám zatím ale žádné hodnoty.
Hned vedle se objevilo nové tlačítko „Zachovat“.
Když se hodnoty absorbance v levém dolním rohu ustálí,
klepnu na toto tlačítko „Zachovat“
a vepíšu koncentraci.
Teď vyměním vzorky,
počkám na ustálení hodnot absorbance
a znovu klepnu na „Zachovat“.
Vložím třetí vzorek,
až se hodnota ustálí, klepnu na „Zachovat“,
a vepíšu koncentraci.
Chci se také ujistit,
že byl zaznamenán neutrální vzorek.
A když mám měření všech vzorků hotovo,
stisknu červené tlačítko „Stop“.
Pak se automaticky nastaví měřítka os,
takže vidím, že se moje data řadí do přímky tak,
jak by podle Beerova zákona měly.
Nyní mohu přímo v Loggeru Pro
proložit přímku
a získat směrnici a průsečík s osou y
potřebné pro výpočet molárního absorpčního koeficientu.
Chci-li s tímto vzorkem provést kinetický experiment,
vrátím se k dialogovému oknu „Konfigurovat spektrometr“
a zvolím závislost absorbance na čase.
Vlnovou délku mohu ponechat nebo zvolit novou.
Stisknu OK.
Tentokrát data nebudu ukládat,
i když bych mohla.
A získám křivku závislosti absorbance na čase.
Výchozí nastavení pro časové měření
jsou jedno měření každých 200 sekund.
Chci-li nastavení změnit, klepnu na ikonu „nastavení sběru dat“,
tady nahoře vedle zeleného tlačítka „Sbar dat“,
a objeví se dialogové okno nastavení „Sbar dat“,
ve kterém mohu dobu měření a vzorkovací frekvenci změnit.
Pro další instrukce ke všemu, co jsme si ukazovali,
k experimentům
a pro plnou specifikaci UV-VIS spektrofotometru
navštivte www.vernier.cz/VSP-UV
Máte-li jakékoli další otázky,
zašlete nám je prosím na info@vernier.cz